病理实验看似简单,实际上稍不注意细节,使用
组织切片机就会漏洞百出,不同组织如何保存?不同切片有何区别?刀法需要慢慢练,但该避的坑你不能不懂!
今天远湘生物汇总了那些关于组织切片机进行病理切片的问题,看小编如何搞定这些实验难题。
一、组织如何保存?
普通病理用固定液(多聚甲醛)保存;免疫组化、免疫荧光实验不宜固定时间太久。
二、不同组织都用一个脱水流程吗?
不同组织,其结构不同,脱水流程也有是区别的
三、石蜡包埋切片一般切的厚度是多少?冰冻切片切多厚?
冰冻切片厚度为6-10um;石蜡切片为4-6um。
四、冰切出现裂痕的原因?
可能是防卷板没放好,冷冻切片机的温度一般是零下10到15℃;还有可能是你的组织比较硬或者是刀片的问题,不同组织切片机里也要不同温度需要注意一下。
五、为什么切片总是脱片?
1、粘附剂因素在制作组织学和病理学石蜡切片时,一般用甘油蛋白做粘附剂,但若甘油蛋白配制的时间过长,蛋白质变性,甘油蛋白的粘附作用即降低,可导致组织切片与载玻片粘附不牢,切片一进入二甲苯溶液即从玻片上脱落下来。
2、温度的影响常规石蜡切片染色,温度一般在20-37较好。组织从二甲苯脱蜡出来,立即进入室温的纯酒精清洗,这样组织一下从37降至4℃左右,一冷一热,热胀冷缩,造成组织容易从载玻片上脱落下来。
3、浸蜡时间的影响,组织取材后在脱水,浸蜡时间和包埋温度上掌握不够准确,特别是腺体组织比较娇嫩,稍有过头组织就变脆,在染色过程中就很容易出现脱片现象。